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CDMO公司关于抗原修复有哪些具体的方法

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发表于 2023-8-30 22:56:38 | 显示全部楼层 |阅读模式
  至今为止,抗原修复有许多种方法,在这些方法中,有的是根据抗体的要求来进行,有的是根据抗原的表达程度来进行,我们则对每种病例每项检测,都要求必须进行抗原修复,以达到抗原全面表达的*状态。以下是CDMO公司生物总结出来的具体抗原修复方法。
  (1)物理化学试剂抗原修复法。
  1. 真空负压抗原修复法:
  ① 切片脱蜡至水。
  ②0.3%H2O2甲醇真空负压处理5分钟。
  ③自来水洗,蒸馏水洗。
  ④0.01M柠檬酸盐缓冲液(PH6.0),真空负压干燥箱预先调至95℃,真空负压处理10分钟。
  ⑤待修复注降至室温的一,PBS洗3次,随后按选好的免疫组化染色方法进行染色。
  2.微波辐射抗原修复法:
  ①切片脱蜡至水。
  ②0.3%H2O2甲醇处理10分钟。
  ③自来水洗,蒸馏水洗。
  ④ 0.01M柠檬酸盐缓冲液(PH6.0),于微波炉内微波辐射10分钟,如检测Er和Pr则需要20辐射分钟左右。
  ⑤待修复液降至室温后,PBS洗3次,随后按选好的免疫组织化学的染色方法进行染色。
  3.高压抗原修复法:
  ①切片脱蜡至水。
  ②0.3%H2O2甲醇处理切片10分钟。
  ③自来水洗,蒸馏水洗。
  ④切片放入抗原修复液中,边同容器放入高压锅中加热至沸腾。盖上压力阀至喷汽后持续1——4分钟。
  ⑤待修复液恢复至室温后,PBS洗3次,随后按选好的免疫组织化学染色方法进行染色。
  4.隔水热抗原修复法:
  ①切片脱蜡至水。
  ②0.3%H2O2甲醇处理切片10分钟。
  ③自来水洗,蒸馏水洗。
  ④切片放入0.01M柠檬酸盐缓冲液(PH0.6)中,边同容器一起放入水溶锅中加热,其间应不断用温度计测其温度,待抗原修复液的温度达到有效温度后(92℃↑)。即开始计时,持续40分钟。
  ⑤待抗原修复液恢复至室温后,PBS洗3次,随后按选定好的免疫组化染色方法进行染色。
  5.电炉加热抗原修复法:
  ①切片脱蜡至水。
  ②0.3%H2O2甲醇处理切片10分钟。
  ③自来水洗,蒸馏水洗。
  ④ 将切片放入抗原修复液中于电炉上加热,不时用温度计测量温度,当达92℃后,即可拔离电源,当温度低于92℃时,再插上电源,如此反复持续至10分钟左右。
  ⑤待抗原修复液降至室温后,PBS洗3次,随后按选定的免疫组化染色方法进行染色。

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